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扫描电镜样本准备方法及要求

1、 动植物组织样本

① 1-3min内取样,组织块取大小5mm³以下,可以多提供点标本,组织不能取太小。用PBS轻轻漂洗将样本表面的血污,毛发等去掉,将需要扫描的面做好标记(如在对面进行剪角处理)。取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤,刀片要锋利避免挫伤组织。尤其是注意保护扫描面,绝对不能碰触挤压扫描面。组织取下后立即投入电镜固定液内室温避光固定2h,再转移至4°保存,4°冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。植物样本放入固定液后需用滤纸或者棉花压着。(如需观察窗孔结构的话需要灌注取材)

② 肠,胃,血管,子宫等标本。先把组织切开后粘在滤纸上,用pbs清洗几次后放入固定液避光固定2h,再转移至4°保存。(皮肤,肠胃等在固定液中易打卷的组织可将组织粘在滤纸上进行固定)

③ 骨,牙齿,毛发,气管等,用pbs多次清洗,把表面粘液、血细胞等清洗干净,再放入电镜固定液中固定。

④ 叶片,花瓣等,标本大小取1cm*1cm左右。

2、 细胞样本

贴壁细胞:细胞必须贴壁于盖玻片上制成爬片,细胞弃培养基,PBS轻轻漂洗后,弃PBS加电镜固定液室温避光固定30min,再转移至4°保存,4°冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

悬浮细胞:离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀米粒大小,弃培养基后PBS轻轻漂洗后,离心弃PBS加电镜固定液,细胞必须吹散悬浮于固定液内室温避光固定30min,再转移至4°保存,4°冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

3、 细菌样本

固体培养基的细菌:细菌必须贴壁于盖玻片上制成爬片,用盖玻片轻轻覆盖在菌落上,在培养箱培养一晚上,第二天轻轻揭下来,放入固定液中室温避光固定30min,再转移至4°保存, 4°冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

悬浮细菌孢子等:离心收集细菌要肉眼可见细菌沉淀芝麻至绿豆大小,弃培养基后用PBS轻轻漂洗后,离心弃PBS加电镜固定液,必须吹散悬浮于固定液内室温避光固定30min,再转移至4°保存,4°冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

4、 其他如粉末状材料

直接准备干燥的粉剂(黄豆大小)。带有磁性的金属(含铁.钴.镍)材料不能做扫描电镜。