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1,外泌体提取
细胞上清样本:一个样本提供70ml的培养上清(细胞在含常规FBS培养基中培养一定时间,待细胞融合度约为60% - 70%时,移去原有含FBS的培养基,换成新鲜的含无外泌体血清的培养基,继续培养3天左右,细胞融合度达到80%-95%左右时,收取细胞上清),干冰运输。
血清样本:血液经普通采血管采集后室温静置30min,3000g离心15min,收集上层血清,5ml,-80℃纯干冰运输。
2,外泌体NTA电镜检测
推荐外泌体送样量为25-30μL(BCA≥0.2ug/uL),采用PBS进行重悬;样本保存于小EP管,长期请保存于-80℃冰箱,直接保存,无需添加任何冻存剂。短期(2天内)保存于4℃冰箱即可。