武汉科锐诺生物科技有限公司

科锐诺生物(查看)-外泌体粒径测试服务

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  • 主营产品:外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
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iTRAQ (isobarictags for relative and absolute quantitation,同位素标记相对和绝1对定量)是由AB SCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种(或4种)不同的同位素试剂来同时标记和比较8种(或4种)不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成:报告部分,肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数,肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连,可标记所有酶解肽段,平衡部位可保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比,因此改变任一iTRAQ试剂,不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测,分子量都完全相同。而在串联质谱中,同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰,因此,根据波峰的高度及面积,可以得到蛋白质的定量信息。









实验室采用Zetaview(品牌:Particle Metrix)进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。

目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗1体标记的外泌体。





外泌体(Exosome)是活1细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊泡,存在于体液中,包括血液、唾液、尿液羊水等多种体液中,并携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息,能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能,是细胞和细胞间信息传递的重要方式。

体液中外泌体 RNA(特别是 miRNA 等非编码 RNA)在健康与癌1症中存在明显 的表达差异。因此外泌体里的 miRNA 常常成为某些疾病的 biomarker。