武汉科锐诺生物科技有限公司

水稻RNA原位杂交技术服务-科锐诺生物(在线咨询)

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  • 主营产品:外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
  • 公司地址:湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼
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信息详情
近年来基因检测在结1核病诊断中应用越来越广泛,但主要应用于痰液等新鲜标本,在石蜡包埋组织标本中应用非常少。我们建立了利用荧光定量PCR及膜探针杂交法鉴别诊断结1核病与非结1核分枝杆1菌病的分子病理检测方法;建立了利用高分辨溶解曲线法检测1线抗结1核核1心药1物利福平及异烟肼的耐药情况的分子病理检测方法。我们在首都临床医学发展专项的资助下进行大样本临床验证。这些方法也将陆续转化为我院分子病理诊断项目。














癌组织原位杂交实验步骤:

       1. 将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。

       2. 玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。

       3. 石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。

       4. 暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。





适用场景

1、高灵敏度地检测蛋白-蛋白的交互作用;

2、寻找在蛋白-蛋白交互作用中起关键作用的结构域或活性位点;

3、寻找与靶蛋白相互作用的新蛋白;

4、寻找具有药1物治1疗作用的小分子多肽;

5、寻找调控蛋白质相互作用的化合物;

6、绘制蛋白质相互作用图谱。

酵母双杂交技术的优点

1、无需纯化蛋白;

2、检测在活1细胞内进行,可以在一定程度上代表体内的真实情况;

3、检测的结果是基因表达产物的积累效应,因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用;

4、酵母双杂交系统可采用不同组织、器1官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA文库,并能分析细胞质、细胞核等多种亚细胞部位的蛋白。