分子病理技术服务-科锐诺-武汉科锐诺生物科技有限公司

分子病理技术服务-科锐诺

武汉科锐诺生物科技有限公司

主营产品：外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
公司地址：湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼

咨询热线： 18627856353

立即咨询 QQ咨询

信息详情

菌落的裂解及DNA结合于纤维素滤膜

（1）在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，将滤膜放到小洼上，展平保鲜膜，使滤膜均匀湿润，让滤膜留于原处2-3分钟。

（2）用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜，用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/L NaOH重复步骤（1）。

（3）吸干滤膜，将滤膜转移到新的带有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜，再重复一次该步骤。

（4）吸干滤膜，把它转移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜，转移到一张干的滤纸上，置于室温20-30分钟，使滤膜干燥。

（5）将滤膜夹在两张干的滤纸之间，在真空烤箱中于80℃干烤2小时，固定DNA。

（6）将固定在膜上的DNA与32 P标记的RNA进行杂交。

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH）是在20世纪80年代末在性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法，探针首先与某种介导分子（reporter molecule）结合，杂交后再通过细胞化学过程连接上荧光染料[1,2].FISH的基本原理是将DNA（或RNA）探针用特殊的核苷酸分子标记，然后将探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上，再用与荧光素分子偶联的单与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析.FISH具有安全、快速、灵敏度高、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点，不但能显示中期分裂相，还能显示于间期核.同时在荧光原位杂交基础上又发展了多彩色荧光原位杂交技术和染色质纤维荧光原位杂交技术.

原位杂交的应用范围：

①细胞特异性mRNA转录的定位，可用于基因图谱，基因表达和基因组进化的研究；

②感1染组织中病毒DNA/RNA的检测和定位，如EB病毒mRNA、人类乳1头状瘤1病毒和巨细胞病毒DNA的检测；

③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测；

④基因在染色体上的定位；

⑤检测染色体的变化，如染色体数量异常和染色体易位等；

⑥分裂间期细胞遗传学的研究，如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定，某些肿1瘤的诊断和生物学剂量测定等。

上一条：植物半薄切片技术服务-科锐诺(在线咨询)

下一条：武汉科锐诺(多图)-花芽原位杂交检测技术服务

武汉科锐诺生物科技有限公司

武汉科锐诺生物科技有限公司

植物切片

科研服务

联系我们

分子病理技术服务-科锐诺

武汉科锐诺生物科技有限公司

网站导航

产品中心

联系我们

扫一扫关注我们